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冷凍干燥機(jī)凍干保存細(xì)菌菌種操作步驟

點(diǎn)擊次數(shù):1938    更新時(shí)間:2017-04-28

  冷凍干燥機(jī)用于細(xì)菌領(lǐng)域也常被稱為菌種冷凍干燥機(jī)、細(xì)菌凍干機(jī)、菌種凍干機(jī)等,可以用于凍干保存細(xì)菌、菌種等,其操作步驟如下:

1. 所用培養(yǎng)基及凍干保護(hù)劑均高壓滅菌;

2. 取分離所得細(xì)菌菌液或甘油保存的細(xì)菌一環(huán),在培養(yǎng)板上分區(qū)或蛇形劃板(大腸桿菌在麥康凱平板上劃板),37℃倒置培養(yǎng)過(guò)夜;

3. 取一只干凈的試管,倒入約10mL培養(yǎng)液(大腸桿菌用LB培養(yǎng)液),從培養(yǎng)過(guò)夜的平板中挑取一個(gè)單菌落于該培養(yǎng)液中,37℃振蕩培養(yǎng)過(guò)夜;

4. 取10個(gè)干凈的西林瓶,每瓶加入1mL凍干保護(hù)劑,再加入1mL培養(yǎng)過(guò)夜的菌液,蓋上橡膠塞,留出氣孔,標(biāo)記好之后放入-80℃冰箱使其冷凍;

5. 啟動(dòng)冷凍干燥機(jī)預(yù)熱約30min,迅速將已冷凍的菌液放于冷凍干燥機(jī)上,一般十幾小時(shí)之后細(xì)菌已凍干,關(guān)閉冷凍干燥機(jī),取出已凍干的細(xì)菌,壓蓋,放于-80℃超低溫冰箱保存,可達(dá)十年之久。

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